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钙离子荧光探针Fluo4应用详解

钙离子荧光探针Fluo4应用详解
理化性质
  吸收波长/发射波长:506nm /526nm(低/高钙)
  钙离子荧光探针Fluo4保存与使用:粉状的FLUO-3AM应保存于-20度以上。建议使用DMSO作为溶媒。在溶解前,FLUO-3AM和DMSO均须放置至室温。溶解过程可能会比较慢。用无水的DMSO溶解的FLUO-3AM长期保存,应严格密封,并保存于-20度。使用前,将保存液放置至室温后再打开。可避免AM探针在长期的保存过程中水解。
工作原理
  钙离子荧光探针Fluo4广泛用于长波长的荧光钙指示剂。其在506NM处被吸收,可以被氩离子激光的488nm激发光激发,便于检测。FLUO-3在没有同钙结合的情况下,无荧光产生。但是,在与钙结合后,荧光(526nm)增强至少40倍。Fluo-3 AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。Fluo-3 AM的荧光非常弱,其荧光不会随钙离子浓度升高而增强。Fluo-3 AM进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成Fluo-3,从而被滞留在细胞内。Fluo-3可以和钙离子结合,结合钙离子后可以产生较强的荧光,*大激发波长为506nm,*大发射波长为526nm。实际检测时推荐使用的激发波长为488nm左右,发射波长为525-530nm。

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