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西安百萤生物科技有限公司 主营:百萤生物围绕荧光发光、荧光标记、荧光探针等技术进行产品研发,公司产品广泛用于核酸蛋白定量、细胞凋亡研究、细胞信号通路研究、细胞及线粒体膜电位检测、细胞器染色、活体示踪、抗体标记等科研领域。
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钙离子荧光探针Fluo3的悬浮细胞及组织切片

 
悬浮细胞
A. 离心收集细胞样品于1.5ml离心管内,加入0.5ml固定液,缓缓悬起细胞,固定10分钟或更长时间(可4℃过夜)。
B. 离心去固定液,用PBS或0.9%NaCl洗两遍,每次3分钟。洗涤期间手动晃动。
C. *后一次离心后吸去大部分液体保留约50ml液体,再缓缓悬起细胞,滴加至载玻片上,尽量使细胞分布均匀。
D. 稍晾干,使细胞贴在载玻片上不易随液体流动。
E. 均匀滴上0.5ml Hoechst 33258染色液,染色5分钟。用吸水纸从边缘吸去液体,微晾干。
F. 用PBS或0.9%NaCl洗两遍,每次3分钟。
G. 钙离子荧光探针Fluo3滴一滴抗荧光淬灭封片液于载玻片上,盖上一洁净的盖玻片,尽量避免气泡。
H. 荧光显微镜可检测到呈蓝色的细胞核。激发波长在350nm左右,发射波长在460nm左.
 

组织切片
A. 对于任何常见切片,处理至常规可以进行**染色时,或完成常规的**染色后,即可进行后续的Hoechst染色。
B. PBS或0.9%NaCl洗两遍,每次3分钟,吸尽液体。洗涤时宜用摇床,或手动晃动数次。可在六孔板中操作。
C. 加入0.5ml Hoechst 33258染色液,染色5分钟。也宜用摇床,或手动晃动。
D. 用PBS或0.9%NaCl洗两遍,每次3分钟。
E. 将切片置于载玻片上,滴一滴抗淬灭封片液,盖上一洁净的盖玻片,尽量避免气泡。
F. 荧光显微镜可检测到呈蓝色的细胞核。激发波长在350nm左右,发射波长在460nm左右,
Hoechst 33258的吸收光谱和发射光谱,左侧峰为吸收光谱,右侧峰为发射光谱。
 


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